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先用肉湯培養基復活，此為菌種*代；從營養肉湯培養物中挑菌液劃相應的選擇性培養基平板，選擇典型菌落，接種于營養瓊脂斜面，此為菌種第二代；一個月后，從斜面上挑菌劃相應的選擇性培養基平板，選擇典型菌落，接種于營養瓊脂斜面，此為菌種第三代；依次下去，直至第五代，就可以不再接了，可以買新的菌種了。

1.選擇復活用的培養基,可選用說明書中推薦的培養基,根據菌株的分類進行選擇,請說明購買菌株的類型或名稱；

2.選擇菌株保存的方法：冷凍真空干燥保藏法（可保存10年以上，需真空冷凍干燥機等設備）、超低溫保藏（可保存兩年左右，但需有-80℃冰箱）、定期移植保藏法（可保存1-6月） ，請根據實際情況進行選擇；

3.準備需要的培養基、保存管、甘油、尖頭吸管（有時常規吸管太粗，無法深入菌種管底部）、開啟工具等；

4.無菌開啟菌種管，將管內干粉溶解轉入相關培養基，培養后選擇保存菌種的代數；

5.進行驗證實驗（革蘭氏染色、菌落形態、生化試驗、血清試驗或其他鑒定系統等），確認后保存菌種，注意整個過程的無菌操作。